Характер экспрессии мРНК iNOS и еNOS в миокарде крыс с алкогольной кардиомиопатией и на фоне проводимой терапии метаболитотропными кардиопротекторами

Abstract

В останній час у якості ще одного механізму ушкодження міокарду при алкоголізмі стали розглядати систему NO. У наш час майже відсутні роботи про характер експресії мРНК iNOS та еNOS в міокарді при алкогольній кардіоміопатії та медикаментозної корекції порушень нітроксидергічної системи. Метою роботи було вивчення характеру експресії мРНК iNOS та еNOS в міокарді щурів при експериментальній алкогольній кардіоміопатії на фоні курсового застосування метаболітотропних кардіопротекторів – мілдронату та мексидолу, а також нового оригінального засобу – ангіоліна. Встановлено, що моделювання алкогольної кардіоміопатії призведе до достовірного підвищення експресії мРНК iNOS та пригнічення експресії мРНК еNOS у міокарді експериментальних тварин. Курсове внутрішньошлункове введення Англіоліну (100 мг/кг), Мексидолу (200 мг/ кг) та Мілдронату (250 мг/кг) тваринам з експериментальною кардіоміопатією призводило до змін експресії в міокарді мРНК iNOS і мРНК еNOS у різній спрямованості та ступені вираженості. Введення Мексидолу призводило до підвищення експресії мРНК еNOS стосовно показників контролю, а введення Ангіоліну і відносно інтакту, на тлі зниження експресії мРНК iNOS. Введення Мілдронату не виявляло достовірного впливу на показники експресії мРНК еNOS у міокарді експериментальних тварин та призводило до підвищення експресії мРНК iNOS відносно значень, як контролю, так і інтакту. Отримані дані є експериментальним підґрунтям для застосування Мексидолу та, особливо, Ангіоліну у комплексній терапії алкогольної кардіоміопатії; В последнее время в качестве еще одного механизма повреждения миокарда при алкоголизме стали рассматривать систему NO. В настоящее время практически нет работ о характере экспрессии мРНК iNOS и еNOS в миокарде при алкогольной кардиомиопатии и медикаментозной коррекции нарушений нитроксидергической системы. Целью работы было изучение характера экспрессии мРНК iNOS и еNOS в миокарде крыс при экспериментальной алкогольной кардиомиопатии на фоне курсового применения метаболитоторопных кардиопротекторов — милдроната и мексидола, а также нового оригинального препарата —ангиолина. Установлено, что моделирование алкогольной кардиомиопатии приводит к достоверному повышению экспрессии мРНК iNOS и подавлению экспрессии мРНК еNOS в миокарде экспериментальных животных. Курсовое внутрижелудочное введение Ангиолина (100 мг/кг), Мексидола (200 мг/кг) и Милдроната (250 мг/ кг) животным с экспериментальной кардиомиопатией приводило к изменению экспрессии в миокарде мРНК iNOS и мРНК еNOS в разной направленности и степени выраженности. Введение Мексидола приводило к повышению экспрессии мРНК еNOS относительно значений контроля, а введение Ангиолина и относительно интакта, на фоне снижения экспрессии мРНК iNOS. Введение Милдроната не оказывало достоверного влияния на показатели экспрессии мРНК еNOS в миокарде экспериментальных животных и приводило к повышению экспрессии мРНК iNOS относительно значений как контроля, так и интакта. Полученные данные являются экспериментальным обоснованием для применения Мексидола и, особенно, Ангиолина в комплексной терапии алкогольной кардиомиопатии; The prevalence of alcohol abuse, high mortality and alcoholic injury of heart muscle allow identifying alcoholic cardiomyopathy as the most relevant problem in modern medicine. Recently, as another mechanism of myocardial damage during alcoholism, the NO system has been considered. At present, there is practically no work about the mRNA expression of iNOS and еNOS in the myocardium in alcoholic cardiomyopathy and drug-induced correction of nitroxidergic system disorders. The aim is to study the character mRNA expression of the iNOS and еNOS in rat’s myocardium with experimental alcoholic cardiomyopathy against the use of metabolitotoropic cardioprotectors mildronate and mexidol, and against a new original drug angiolin. It is found that the alcoholic cardiomyopathy simulation resulted in a significant increased mRNA expression of iNOS and inhibition mRNA expression of eNOS in the experimental animals’ myocardium. Sixty white mongrel rats of males with a body weight of 180-200 g and age of 4.5 months, who were kept in the vivarium with free access to food, were used in the experiments. Alcoholic cardiomyopathy was caused by daily intragastric injection of a 20% solution of ethanol at a dose of 8 g/kg for 90 days. From 90 days, alcoholization was stopped and experimental therapy was performed with the studied drugs, and the observation continued for 30 days. Test drugs were administered intragastrically using a metal probe – Angiolin ((S)-2,6-diaminohexanoic acid 3-methyl-1,2,4-triazolyl-5-thioacetate) (NPA «Farmatron», Ukraine) — 100 mg/kg; Mildronate (Grindeks, Latvia) — 250 mg/kg; Mexidol (NPK Pharmasoft Ltd., Russia) — 200 mg/kg. The control and the intact groups received saline. At the end the animals were removed from the experiment in 2-4 minutes after injection of sodium ethaminal (40 mg/kg). To evaluate the mRNA expression state of iNOS and eNOS, real-time reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) in myocardial sections (5 microns) was used. The results of the study were processed using a statistical package of the licensed programs «STATISTICA for Windows 6.1» (StatSoft Inc.), «SPSS 16.0», «Microsoft Excel 2003». It has been established that the alcoholic cardiomyopathy modeling leads to a significant increase mRNA expression of iNOS and inhibition mRNA expression of eNOS in the experimental animals’ myocardium. The course injection of metabotropotropic cardioprotectors Angiolin, Mexidol and Mildronate to animals with experimental cardiomyopathy resulted to a change in the mRNA expression of iNOS and eNOS in the myocardium in different directions and severity. Thus, the Mexidol injection led to an increase in the mRNA expression of eNOS relative to control values, Angiolin injection – to control and intact, against a background decreased mRNA expression of iNOS relative to control. Mildronate injection did not significantly affect the mRNA expression of eNOS and led to an increase mRNA expression of iNOS in the myocardium of experimental animals relative to both control and intact. Increasing the expression of endothelial NOS and reducing the expression of inducible NOS can be regarded as a manifestation of the endothelioprotective and cardioprotective effects of angiolin. The obtained data are experimental justification for the use of Mexidol and, especially, Angiolin in the complex therapy of alcoholic cardiomyopathy.