Спосіб імуногістохімічної детекції пептидних комплексів на парафінових гістологічних зрізах тканин

Abstract

Спосіб імуногістохімічної детекції пептидних комплексів на парафінових гістологічних зрізах тканин, що включає відбір тканинного матеріалу, фіксацію у нейтральному забуференому формаліні, регідратацію гістологічних зрізів і видалення із них залишків парафіну, демаскування антигену, блокування ендогенної пероксидази і потім неспецифічної сорбції імуноглобулінів, обробку гістологічних зрізів первинними та вторинними антитілами проявлення пероксидазної активності з 3-аміно-9-етилкарбазолом (ЕАК), фарбування, візуалізацію та оцінку локації пептидних комплексів в тканинах за наявністю специфічного забарвлення продукту реакції, який відрізняється тим, що фіксацію тканин здійснюють у 4 % нейтральному забуференому формаліні впродовж 8 годин, а демаскування антигенної специфічності пептидних комплексів проводять із застосуванням технології мікрохвильової обробки, інкубують гістологічні зрізи з поліклональними антитілами (інактивована сироватка кроля, імунізованого поліпептидами кіркової речовини нирок та стегнових м'язів щурів) з наступною інкубацією їх з вторинними антитілами (кон'югатом пероксидази хрону з моноспецифічними афінно очищеними антитілами вівці до імуноглобулінів кроля (IgG, IgA та IgM).