Порівняльне вивчення ефективності виділення Clostridium difficile з досліджуваного матеріалу в експерименті з різними поживними середовищами

Abstract

Проводили порівняльне вивчення ефективності виділення Сlostridium difficile з досліджуваного матеріалу в експерименті з різними поживними середовищами. Проведеними дослідженнями встановлено, що найбільш ефективною схемою виділення С. difficile з експериментального матеріалу був пересів з транспортного середовища Еймса в рідкі середовища збагачення (бульйон Шадлера або бульйон з серцево-мозковою витяжкою), а потім – на циклосерин цефокситин фруктозний агар. Ефективність цих схем виділення статистично не відрізнялась між собою. На відміну від використання лише середовища ССFA, схеми виділення з застосуванням рідких середовищ збагачення дозволяли виділяти бактерії С. difficile з усіх перевірених розведень культури. Проведеними дослідженнями встановлено, що найбільш ефективною схемою виділення С. difficile з експериментального матеріалу був пересів з транспортного середовища Еймса в рідкі середовища збагачення (бульйон Шадлера або бульйон з серцево-мозковою витяжкою), а потім – на циклосерин-цефокситин фруктозний агар. На відміну від використання лише середовища ССFA, схеми виділення з застосуванням рідких середовищ збагачення дозволяли виділяти бактерії С. difficile з усіх перевірених розведень культури. Перевірка ефективності середовища Еймса для забору та збереження культур С. difficile протягом 1-5 діб показала, що кількість вирослих колоній статистично не змінювалась протягом всього терміну збереження. Таким чином, середовище Еймса забезпечує збереження культури С. difficile в клінічному матеріалі протягом 5 діб.

Проводили сравнительное изучение эффективности выделения Сlostridium difficile из исследуемого материала в эксперименте с разными питательными средами. Проведенными исследованиями установлено, что наиболее эффективной схемой выделения С. difficile из экспериментального материала был пересев с транспортной среды Эймса в жидкие среды обогащения (бульон Шадлера или бульон с сердечно-мозговой вытяжкой), а потом – на циклосерин-цефокситин фруктозный агар. Эффективность использования этих схем выделения статистически не отличалась между собой. В отличие от использования лишь среды ССFA, схемы выделения с применением жидких сред обогащения позволяли выделять бактерии С. difficile из всех исследованных разведений культуры. Проведенными исследованиями установлено, что наиболее эффективной схемой выделения С. difficile из экспериментального материала был пересев с транспортной среды Эймса в жидкие среды обогащения (бульон Шадлера или бульон с сердечно-мозговой вытяжкой), а затем – на циклосерин-цефокситин фруктозный агар. В отличие от использования только среды ССFA, схемы выделения с применением жидких сред обогащения позволяли выделять бактерии С. difficile из всех проверенных разведений культуры. Проверка эффективности среды Эймса для забора и сохранения культур С. difficile на протяжении 5 суток показала, что количество выросших колоний статистически значимо не изменялось на протяжении всего периода сохранения культуры. Таким образом, среда Эймса обеспечивает сохранение культуры С. difficile в клиническом материале на протяжении 5 суток.

Diseases associated with Clostridium difficile infection are a serious problem for modern medicine. The use of culture methods to detect C. difficile pathogen and its toxic properties does not lose its importance, despite the presence of various laboratory methods of diagnosis. Scientific researches of last years aimed at comparative study of different methods of cultivation and growth qualities of nutrient media, it has been established that the method of heat treatment of the researched material with subsequent sowing on a selective medium (most often cycloserine-cefoxitin fructose agar) is most effective. The purpose of the research was to experimentally compare different nutrient media for the most effective isolation of C. difficile from clinical material. Due to the difficulty of isolating C. difficile (the number of bacteria in the intestines of patients can be significantly reduced due to the presence of liquid frequent feces), the effectiveness of seeding the material from the transport medium on a selective agar was comparable, or first hanging in the different liquid media of enriching, and then on selective agar. Also, the effectiveness of the transport media by Aims for catching and maintaining the survival of C. difficile for 1-5 days was studied. The effectiveness of the transport media by Aims for catching and maintaining the survival of C. difficile for 1-5 days was studied in the experiment by introducing microbial mixes of the museum strains of C. difficile No. 258, No. 281 and the clinical strain into test tubes by Aims at a final concentration of 107 CFU per 1 ml. They were kept at +4°C and sown on the CCFA, counted the number of grown colonies. We conducted a comparative study of the effectiveness of the isolation of Clostridium difficile from clinical material in an experiment with different nutrient media. Conducted the comparative study of effectiveness of the isolation of Сlostridium difficile from the clinical material in an experiment with different nutrient media. Undertaken studies it is set that the most effective scheme of isolation of С. difficile from clinical material was subculturing from a transport media by Aims in the liquid media of enriching (Schadler broth or modified broth with cardiobrain extraction), and then to selective cycloserin-cefoxitin fructose agar. Effectiveness of these scheme of isolation statistically did not differ inter se. Unlike the use only of solid media of ССFA, the scheme of isolation with the use of liquid media of enriching allowed to distinguish to the bacterium of С. difficile from all tested breeding of culture. Coming from foregoing, recommend to conduct the isolation of bacteria of С. difficile from clinical material by means of the use of liquid media of enriching – Schadler broth or modified broth with cardio-brain extraction with the further sowing on cycloserin-cefoxitin fructose agar. Testing the effectiveness of the transport media by Aims for catching and maintaining the survival of C. difficile for 1-5 days was showed that the number of grown colonies has not statistically changed throughout the shelf-life.