Порівняння локальної імунної відповіді при загостренні ХОЗЛ та гострому флегмонозному апендициті за даними імуногістохімічного дослідження

Abstract

Патогенез патологій легень (ХОЗЛ) та перитоніту тісно пов’язаний з залученням різноманітних клітин вродженого та набутого імунітету, які беруть участь в хронічному та гострому запаленні як на системному, так і на локальному рівнях. Для успішного лікування цих патологій необхідно провести паралельне визначення порушень локального імунітету при зазначених патологічних запальних процесах в легенях і черевній порожнині. Саме ці дослідження стали метою даної роботи. У дослідження було включено 10 пацієнтів з ХОЗЛ та 21 пацієнт з гострим флегмонозним апендицитом. Групу контролю склали 6 пацієнтів, у яких не було ХОЗЛ, та 15 пацієнтів, у яких не було запалення черевної порожнини. Результати дослідження встановили, що при гострому флегмонозному апендициті на відміну від ХОЗЛ локальна імунна відповідь реалізується за рахунок інфільтрації власної пластинки макрофагами, Кі-67+ клітинами в В-лімфоцитах та Т-клітинах пам’яті. Схожість запалення при ХОЗЛ та флегмонозному апендициті характеризується підвищеною міграцією Т-лімфоцитів (CD3+), Т-хелперів (CD4+) та цитотоксичних Т-лімфоцитів (CD8+) в стінку власної пластинки, хоча з більшою інтенсивністю в порівнянні з ХОЗЛ.

Патогенез заболевания легких (ХОБЛ) и перитонита тесно связан с привлечением различных кле- ток врожденного и приобретенного иммунитета, которые принимают участие в хроническом и остром воспалении как на системном, так и на локальном уровнях. Для успешного лечения этих заболеваний необходимо провести параллельное изучение нарушений локального иммунитета при указанных воспалительных патологических процессах в легких и брюшной полости. Именно эти исследования стали целью представленной работы. В работе были использованы материалы от 10 больных с ХОБЛ и от 21 пациента с острым флегмонозным аппендицитом. Группу контроля составили 6 человек без патологии легких ХОБЛ, и 15 человек без патологии органов брюшной полости (гнойного флегмонозного аппендицита). Результаты исследования по- казали, что при остром флегмонозном аппендиците, в отличие от ХОБЛ, локальный иммунный ответ реализуется за счет инфильтрации собственной пластинки макрофагами, Кі-67+ клетками в В-лимфоцитах и Т-клетках памяти. Сходство воспаления при ХОБЛ и флегмонозном аппендиците характеризуется повышенной миграцией Т-лимфоцитов (CD3+), Т-хелперов (CD4+) и цитотоксических Т-лимфоцитов (CD8+) в стенку собственной пластинки, хотя этот процесс отличается большей интенсивностью при ХОБЛ.

Objective: use immunohistochemical approach to analyze the immunocompetent cell composition of terminal bronchioles in patients with chronic obstructive pulmonary diseases (COPD) and immunocompetent cells of the lamina propria of the appendix in patients with acute phlegmonous appendicitis. Object and methods. Histological samples originated from 10 patients who had been operated on account of bullous emphysema (COPD) and 21 patients with acute phlegmonous appendicitis. The control group consisted of 6 patients who did not have COPD and 15 patients who did not have inflammation of the abdominal cavity. Lung tissue and the lamina propria tissue samples were taken accordingly from both groups and submitted for sectorbased cross section analysis. Tissue samples of the lung and lamina propria were placed into 10% neutral-buffered formalin for 18-24 hours. After that, tissue pieces were extracted. 3 slices 3-5 mm long were obtained by cross section of the lung tissue. The samples were dehydrated using ethanol solutions of different concentrations and dipped in paraffin wax. Serial cross-section samples 4 mkm in width were produced using a rotatary microtome (Leica RM 2125 RT, Germany). The samples were placed on slides and colored using hematoxylin and eosinum (Merck, Germany) and on the SuperFrost Plus adhesive slides for further immunohistological research. Immunohistochemical (IHC) studies were performed by using primary monoclonal antibodies of mouse to Ki-67 (proliferation index), CD3, CD4, CD8, CD20, CD45, CD45R0 and CD68 (DAKO, Denmark) and EnVision + System-HRP imaging systems (DAB). The data obtained in the experiment was statistically processed using “Minitab 16” statistical software. Results and their discussion. The results of the study established that, in acute phlegmonous appendicitis, unlike COPD, a local immune response is realized by infiltration of the lamina propria with macrophages, Ki-67 + cells, B-lymphocytes and memory T-cells. The similarity of inflammation in COPD and phlegmonous appendicitis is characterized by increased migration of T-lymphocytes (CD3 +), T-helpers (CD4 +) and cytotoxic T-lymphocytes (CD8 +) into the lamina propria, although with greater intensity for COPD. Significance of the research. The importance of the application of this data based both on quantitative and qualitative characteristics of the local response of CD4+ and CD8+ T – lymphocyte subpopulations is undeniable. On the one hand, these subpopulations determine the course that the disease will take in COPD patients and aid in developing the most efficient and specific immune therapy. On the other hand, acute local inflammation of the lamina propria in the appendix is associated with increased infiltration of the mucous membrane by B-lymphocytes, macrophages, and memory T-cells, as well as active proliferation of mononuclear cells. The author is convinced that individual approach to treatment of COPD patients and patients with peritonitis is vital. These findings serve as helpful diagnostic criteria for COPD and acute phlegmonous appendicitis accordingly.