Роль поліморфізмів генів толл-подібних рецепторів 2, 4 та білку клітин Клара в розвитку бронхіальної астми

Abstract

Роль поліморфізмів генів толл-подібних рецепторів 2,4 та білку клітин клара в розвитку бронхіальної астми - Рукопис. Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата медичних наук за спеціальністю 14.03.08 - імунологія та алергологія. - Національний медичний університет ім. О.О. Богомольця, Київ, 2014. У дисертаційній роботі наведено теоретичне узагальнення і нове вирішення наукового завдання імунології та алергології стосовно визначення генетичної детермінованості при бронхіальній астмі шляхом дослідження ролі толл-подібних рецепторів вродженого імунітету (за поліморфізмами 2258G/A гену TLR2, 896A/G гену TLR4, АЗ 8G гену СС 16) та аналізу зв’язків між особливостями генотипів хворих, показниками стану імунітету та клінічним перебігом захворювання. З’ясовано, що в групі хворих на бронхіальну астму достовірно частіше зустрічається генотип GA (11,1%) гену TLR2 у порівнянні з групою контролю. У пацієнтів, які є носіями алелі А гену TLR 2 в анамнезі частіше відмічались пневмонії, були ознаки кандидозу, а також знижувався рівень IL-4 та наростала експресія IL-10 у порівнянні з пацієнтами без генетичних змін. При вивченні поліморфізму гену TLR 4 з’ясовано, що генотип AG статистично вірогідніше зустрічається в групі з бронхіальною астмою (15,6%) ніж у контрольній групі. У хворих з поліморфізмом 896 А/G гену TLR 4 захворювання починалось з дитинства, у спектрі сенсибілізації були харчові чинники, мали місце прояви іншої алергічної патології, у цих осіб достовірно знижувалася експресія CD4 +/25+/Foxp3 + Т-клітин та рівень IL-10. Поліморфний варіант 38G гену СС 16 достовірно частіше зустрічався у хворих на бронхіальну астму ніж у групі контролю. Особливостями клінічних проявів бронхіальної астми у хворих, які є носіями алелі 38G гену СС 16 є: грибкова сенсибілізація, атопічний дерматит та туберкульоз в анамнезі. Цим пацієнтам показане частіше застосування глюкокортикостероїдів. У них відмічений вищий рівень загального Ig Е у осіб з генотипом AG та гомозиготним GG варіантом гену СС 16 у порівнянні з генотипом АА. У роботі показано важливе значення вивчення поліморфізмів генів TLR2, TLR4, СС 16 для розуміння клінічного перебігу бронхіальної астми.

Ляховская Н.В. Роль полиморфизмов генов толл-подобных рецепторов 2, 4 и белка клеток Клара в развитии бронхиальной астмы. - Рукопись. Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук по специальности 14.03.08 - иммунология и аллергология. -Национальный медицинский университет им. А. А. Богомольца, Киев, 2014. 21 В диссертационной работе приведено теоретическое обобщение и новое решение научной задачи иммунологии и аллергологии по определению генетической предрасположености к развитию бронхиальной астмы путем исследования роли толл-подобных рецепторов (полиморфизм 2258G / А гена TLR 2, 896А / G гена TLR 4, A38G гена СС 16) и анализа связей между особенностями генотипов больных, показателями состояния иммунитета и клиническим течением заболевания. В ходе работы определены содержания в сыворотке крови Ig Е, IL-4, -10, которые проводили иммуноферментным методом. Количество CD4+CD25 + Foxp3 - Т-клеток исследовали методом проточной цитофлюориметрии. Изучение полиморфизмов генов 2258G / А гена TLR2, 896А / G гена TLR4, а также A38G гена СС 16 было проведено методом полимеразной цепной реакции с использованием специфических праймеров. Работа основана на результатах исследования 135 особ. Распределение по группам тяжести среди 45 больных бронхиальной астмой состоялась следующим образом: у 5 пациентов -интермиттирующий характер течения астмы, у 23 человек - легкая степень тяжести, персистирующие течение, а у 17 — средняя степень тяжести персистирующего течения. У 71% обследованных больных обнаружены проявления аллергии в семье. Характерным является ранние проявления атопии. Так, атопический дерматит в детстве наблюдался у 48,8% опрошенных, из них у 28,9% симтпомы развивались по типу “атопического марша”. Сезонность обострений астмы у 15,5% больных отмечалась с июля по октябрь, а в 6,6% - с мая по июль. При исследовании спектра сенсибилизации у больных астмой выявлено, что чаще всего приступы затрудненного дыхания вызывали бытовые аллергены (62,2%). Второе место занимают пыльцевые аллергены (55,5%), среди них: пыльца амброзии, хлебных злаков, тимофеевки, тополя. Пищевая аллергия диагностировалась у 31,1% больных. Типичный спектр пищевых аллергенов составлял: цитрусовые, мед, аллергены яичного белка. Сенсибилизацию к эпидермальным аллергенам имели 28,9%, к грибковым аллергенам представителей рода Penicillium и рода Aspergillus - 14,2% пациентов. Признаки сенсибилизации к одному аллергену отмечены у 22,2% больных, к двум и более аллергенам - у 42,2% из числа всех обследованных. У 28 (62,2%) пациентов в анамнезе были проявления других аллергических патологий (риноконъюктивит, ринит, дерматит). Больные указывали на перенесенную соматическую патологию. Так, заболевания желудочно-кишечного тракта отметили 51,1% пациентов. Патология ЛОР органов анамнестически наблюдалась у 37,8% больных (в основном - тонзиллиты, фарингиты, синуситы, ангины). При оценке результатов иммунологических исследований (уровни IgE, IL-4, IL-10, CD4 +CD25 + Foxp3 +) определено, что у больных бронхиальной астмой концентрация Ig Е составила 164,9 ± 13,89 МОд/мл, IL-4 - 59,5 ± 8,2 пг/мл, уровень CD4+CD25+ Foxp3 - 0,04±0,01 (х 109/л), что превышает норму практически здоровых людей. Уровень IL-10 составлял 0,45±0,02 пг/мл. При сравнении этих показателей в зависимости от тяжести течения заболевания статистически значимого различия не было. У больных бронхиальной астмой достоверно чаще встречается генотип GA (11,1%) гена TLR2 по сравнению с группой контроля. У пациентов, которые являются носителями аллели А гена TLR 2 в анамнезе чаще отмечались пневмонии, были признаки кандидоза, а также снижался уровень IL-4 и возрастала экспрессия IL-10 по сравнению с пациентами без генетических изменений. При изучении полиморфизма гена TLR4 установлено, что генотип AG статистически достоверно чаще встречается в группе с бронхиальной астмой (15,6%), чем в контрольной группе. У больных с полиморфизмом 896А / G гена TLR 4 заболевание начиналось в детстве, в спектре сенсибилизации были пищевые факторы, проявления другой аллергической патологии. У этих лиц достоверно снижалась экспрессия CD4+ 25 + Foxp3 + Т-клеток и уровень IL-10. Полиморфный вариант 38G гена СС 16 достоверно чаще встречался у больных бронхиальной астмой чем в группе контроля. Особенностями клинических проявлений бронхиальной астмы у больных, которые являются носителями аллели 38G гена СС 16 являются: грибковая сенсибилизация, атопический дерматит и туберкулез в анамнезе, необходимость в частом приеме ГКС; повышений уровень общего Ig Е у лиц с генотипом AG и гомозиготным GG вариантом гена СС 16 по сравнению с генотипом АА. В работе показано важное значение изучения полиморфизмов генов TLR 2, TLR 4, СС 16 для понимания течения бронхиальной астмы.

Lyakhovskaya N.V. The role of polymorphisms of genes toll-like receptors 2, 4, and Clara cell protein in the development of asthma. -Manuscript. Dissertation for a Candidate of Medical Sciences, degree by specialty 14.03.08 - Immunology and Allergology. - National Medical University. A. A. Bogomoltsa, Kiev, 2014. The thesis shows the theoretical generalization and a new solution of scientific problems of immunology and allergy, by definition, genetic determination of bronchial asthma by investigating the role of toll-like receptors in innate immunity (for polymorphism 2258G / A gene TLR2 (rs5743708), 896A / G gene TLR4, A38G gene CC16) and analysis of the relationships between the characteristics of the genotypes of patients, the target, the immune system and the clinical course of the disease. In the group of patients with bronchial asthma was significantly more common genotype GA (11,1%) TLR2 gene compared to the control group. Patients who are carriers of allele A TLR2 gene were more common in the history of pneumonia, there were signs of candidiasis, as well as decreased levels of IL4 and IL 10 expression was growing compared with patients without the genetic change. In the study of gene polymorphism TLR 4 determines that the AG genotype is significantly found in the group of bronchial asthma (15.6%) than in control group. Patients with polymorphism 896A / G TLR4 gene disease begins in childhood, in the spectrum of sensitization were dietary factors, there have been other manifestations of allergic disease, these individuals significantly decreased the expression of CD4 + / 25 + / Foxp3 T cells and the level of IL 10. A polymorphic variant of the gene 38G CC 16 significantly more common in patients with asthma than in the control group. Clinical manifestations of bronchial asthma in patients who are carriers of the gene allele 38G CC16 are fungal sensitization, atopic dermatitis and history of tuberculosis, the need for frequent GCS; The highest level of total IgE in patients with genotype AG and homozygous GG gene variant CC 16 compared with the AA genotype. The paper shows the importance of studying gene polymorphisms TLR2, TLR4, SSI 6 for the understanding of bronchial asthma.