Спосіб визначення локалізації та поляризації макрофагів та моноцитів у плаценті імуногістохімічним методом

Abstract

Спосіб визначення локалізації та поляризації макрофагів та моноцитів у плаценті імуногістохімічним методом включає відбір тканинного матеріалу, фіксацію у нейтральному забуференому формаліні, регідратацію гістологічних зрізів і видалення із цих залишків парафіну, демаскування антигена, блокування ендогенної пероксидази, і потім неспецифічної сорбції імуноглобулінів, обробку гістологічних зрізів первинними та вторинними антитілами проявлення пероксидазної активності, фарбування, візуалізацію та оцінку локації клітин за наявністю специфічного забарвлення продукту реакції. При цьому здійснюють забір біоптатів плаценти розміром 2×3 см з центральної, парацентральної і периферичної частини плаценти в глибину з боку амніотичної та децидуальної оболонок, оцінку локалізації М1 протизапального типу макрофагів/моноцитів визначають за цитоплазматичним маркером CD68+, а М2 протизапального типу макрофагів/моноцитів реєструють за мембранною експресією маркера CD163+ в ділянках амніотичної та децидуальної оболонки, в стромі та фібриноїді термінальних ворсин, всередині капілярів термінальних ворсин та у міжворсинковому просторі, визначення зсуву поляризації роблять за розрахунком співвідношення М1/М2 маркерів макрофагів/моноцитів.