Активатор ППАР-у піоглітазон знижує експресію транскрипційного фактора NF-kB та апоптоз в мононуклеарних клітинах СD64+ крові іп vitro

Abstract

Для дослідження впливу активатора ППАР-у на експресію транскрипційного фактора НЕ-кБ і процеси апоптозу мононуклеари периферичної крові (МНПК) інкубували за наявності піоглітазону в кінцевій концентрації 10, 30 та 100 мкмоль/л. Експресію НЕ-кБ, СВ64 та процеси апоптозу визначали методом проточної цитофлюориметрії, використовуючи відповідні моноклональні антитіла. Розвиток апоптозу вивначали за допомогою анексину V та йодиду пропідіуму. Активація ППАР-у призводила до зменшення кількості ЄВ64+-клітин та максимальних рівнів експресії цих рецепторів, дозозалежного зменшення концентрації НЕ-кБ у суспензії МНПК та серед ЄВ64+-клітин. Аналізуючи апоптоз відмічено зменшення апоптотичних клітин (AnV+PI+-клітин). Отримані результати дають змогу довести, що активація ППАР-у задіяна в регуляції апоптозу МПНК та експресії транскрипційного фактора НЕ-кБ, що свідчить про залучення ППАР-у у регуляцію активності НЕ-кБ, який відіграє одну з провідних ролей в реалізації запалення, онкогенезу тощо.

In order to examine the impact of PPAR-g activator on the expression of kB nuclear transcription factor and apoptosis, the peripheral blood mononuclear cells (PBMC) were incubated with pioglitazone at concentrations 10, 30 and 100 мМ. Expression of NF-kB in CD64+ cells was evaluated by flow cytometry using monoclonal antibodies. The development of apoptosis was evaluated using annexin V and propidium iodide. Activation of PPAR-g resulted in a reduction of the number of CD64+ cells and expression of the maximum levels of these receptors. We also obesrved a dose-dependent decrease of NF-kB concentration in PBMC suspension and in CD64+ cells. While analyzing the apoptosis, the reduction of apoptotic cells (reduction of AnV+PI+ cells) has been observed. The results obtained allow to prove that PPAR-g activation participates in the PBMC apoptosis regulation and in the expression of transcriptional factor NF-kB. Our results indicate for the involvement of PPAR-g in the regulation of NF-kB activity which plays one of the most significant roles in the inflammation realization, oncogenesis, and so on.